采集标本溶血等因素对临床生化检验指标的影响及预防策略

论著栏目

（东营市垦利区疾病预防控制中心检验科，山东    东营    257500）

摘要：目的    分析采集标本溶血等因素对临床生化检验指标的影响及预防策略。方法    采集2019年8月至2021年8月于东营市垦利区疾病预防控制中心检验科进行生化检验的100名健康体检者的血液标本，所有研究对象均抽取4ml血液样本，分为两份，每份2ml，一份正常存放（对照组：血液样本正常离心处理后检测），另一份经人工溶血处理（观察组：人工溶血处理后检测）。比较采血部位、采血时间、样本溶血、送检时间对生化指标检测结果的影响。结果    输液手臂采血者钠、血糖（GLU）、天冬氨酸转氨酶（AST）水平均高于非输液手臂采血者，血尿酸（UA）、谷丙转氨酶（ALT）、IgM、三酰甘油（TG）均低于非输液手臂采血者，差异有统计学意义（P<0.05）。上午空腹采血者GLU、总胆固醇（TC）水平均高于其他时间采血者，TG水平低于其他时间采血者，差异有统计学意义（P＜0.05）。观察组碱性磷酸酶（ALP）、AST、ALT、乳酸脱氢酶（LDH）、钾离子（K+）、TC水平均高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；两组血肌酐（SCr）、TG、GLU、尿素氮（BUN）、UA水平比较差异无统计学意义。标准送检者肌酸激酶（CK）、AST、ALT水平均高于1h后送检者，LDH低于1h后送检者，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论    采集标本溶血等因素会影响部分临床生化检验指标，为提高检验结果的科学性和准确性，应避免采集标本溶血等相关因素的干扰。

关键词： 采集标本溶血；临床生化检验；检测结果；准确性；预防策略

The influence of factors such as hemolysis of collected specimens on clinical biochemical test indicators and prevention strategies

DONG Jianbing

(Department of Laboratory, Kenli District Center for Disease Control and Prevention, Dongying City, Shandong, 257500, China)

Abstract: Objective  To analyze the influence of hemolysis and other factors on clinical biochemical test indicators and prevention strategies. Methods  Blood samples were collected from 100 healthy subjects who underwent biochemical tests in the Laboratory of the Kenli District Center for Disease Control and Prevention, Dongying City from August 2019 to August 2021. All subjects were extracted 4 ml of blood samples, divided into the two parts, each 2 ml, one normal storage (control group: blood samples were detected after normal centrifugation), and the other was treated with artificial hemolysis (observation group: artificial hemolysis was detected after treatment). The effects of blood collection site, blood collection time, sample hemolysis and submission time on the detection results of biochemical indicators were compared. Results  The levels of sodium, blood glucose (GLU) and aspartate aminotransferase (AST) in the infusion arm blood collection were higher than those in the non-infusion arm blood collection, and the levels of uric acid (UA), alanine aminotransferase (ALT), IgM and triacylglycerol (TG) were lower than those in the non-infusion arm blood collection, the differences were statistically significant (P＜0.05). The GLU and serum total cholesterol (TC) levels of fasting blood donors in the morning were higher than those of blood donors at other times, and the TG level was lower than that of blood donors at other times, the differences were statistically significant (P＜0.05). The levels of alkaline phosphatase (ALP), AST, ALT, lactate dehydrogenase (LDH), potassium ion (K⁺) and TC in the observation group were higher than those in the control group, and the differences were statistically significant (P＜0.05). There was no significant difference in serum creatinine (SCr), TG, GLU, urea nitrogen (BUN) and UA levels between the two groups. The levels of creatine kinase (CK), AST and ALT in the standard examiners were higher than those in the examiners after 1 h, and LDH was lower than that in the examiners after 1 h, the differences were statistically significant (P＜0.05). Conclusion  Factors such as hemolysis of collected specimens will affect some clinical biochemical test indicators, in order to improve the scientificity and accuracy of the test results, the interference of related factors such as hemolysis of collected specimens should be avoided.

Keywords: Collection of specimen hemolysis; Clinical biochemical test; Detection results; Accuracy ; Prevention strategies

临床生化检验是临床诊断和治疗的重要依据，检测结果对诊断治疗起决定性作用^[1]。标本溶血是临床检验工作中面临的重要问题，也是血液标本被拒收的主要原因。溶血指的是血液样本在采集、运送、储存等过程中，因为各种因素导致血液里面的红细胞破裂，使得血红蛋白和细胞内成分扩散至血清中。溶血主要与止血带捆扎时间过久、淤血过久、穿刺不畅、样本剧烈震荡、抗凝血混合时力量过大、存放过久等因素相关，样本溶血影响检测结果的可靠性^[2]。一旦发生溶血使血液中相关成分出现变化，且导致血液中血小板和白细胞释放出相关干扰因子，干扰检测结果。研究表明，干扰因子影响临床生化检验结果，导致临床诊治出现偏差，延误患者最佳治疗时机^[3-4]。故对采集标本溶血等因素对临床生化检验指标的影响进行分析，并探讨积极的解决对策意义重大。基于此，本研究旨在探讨正常标本和溶血标本及其他因素对生化指标产生的影响，现报道如下。

1  资料与方法

1.1    临床资料    选取2019年8月至2021年8月于东营市垦利区疾病预防控制中心检验科进行生化检验的100名健康体检者的血液标本。其中男54名，女46名；年龄18～88岁，平均（52.54±9.25）岁；体质量43～82kg，平均（61.25±8.39）kg。本研究经东营市垦利区疾病预防控制中心医学伦理委员会审核批准，且所有体检者均知情同意并签署知情同意书。

纳入标准：①于本科室采集血液标本并行生化检验者；②精神、意识状态正常，可正常沟通、积极配合者。排除标准：①合并糖尿病、高血压、高血脂等慢性代谢性疾病者；②伴有严重心、肝、肾功能障碍者；③有溶血性疾病、凝血功能障碍等血液系统疾病者。

1.2    方法    所有研究对象均抽取4 ml血液样本，分为两份（每份2 ml）按照不同方式检测，一份正常存放（对照组：血液样本正常离心处理后检测），另一份经人工溶血处理（观察组：人工溶血处理后检测）。

1.2.1    仪器试剂    采用全自动生化分析仪（日本东芝生产；40-FR）进行检测，检测前全面检查设备，确保机器无故障，做好校准工作，保证仪器设备满足检测要求；操作流程严格遵照SOP文件进行。

1.2.2    检测方法    对照组血液标本以离心半径10 cm，3000r/min离心min，检测生化指标。观察组实施人工溶血处理，先将血液标本放置于低温环境下（-20℃）保存，0.5 h后取出，将其放置在水浴箱内解冻；发生溶血后立即检测血液内的血红蛋白浓度（溶血标准：血红蛋白浓度达到4g/L），以离心半径10 cm，3 000 r/min离心min，后检测相关生化指标。

1.3    观察指标    ①采血部位对生化结果的影响：第1次抽血后，比较输液手臂和非输液手臂的检验结果，主要检测钠、谷丙转氨酶（alanine aminotransferase，ALT）、血尿酸（uric acid，UA）、血糖（bloodglucose，GLU）、IgM及三酰甘油（triacylglycerol，TG）水平。②采血时间对生化结果的影响：第2次采血时，62名于清晨空腹下采血，38名于其他时间段采血，检测GLU、TG、TC水平。③样本溶血对生化结果的影响：第3次采血后，将血液标本分为2份，每份2ml，检测ALT、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）、天冬氨酸转氨酶（aspartate aminotransferase，AST）、GLU、UA、总胆固醇（serum total cholesterol，TC）、乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）、尿素氮（urea nitrogen，BUN）、血肌酐（serum creatinine，SCr）、TG及钾离子（potassium ions，K+）水平。④送检时间对生化结果的影响：第4次采血，67名于采集血液后直接检验（标准送检），33名采集血液1h后送检，检测肌酸激酶（creatine kinase，CK）、AST、ALT及LDH水平。

检测方法：速率法检测ALT、ALP、LDH、AST等指标。氧化酶法检测GLU水平，酶法检测UA、BUN、CR、TG及CHOL，离子选择性电极法检测K⁺。

1.4    统计学方法    采用SPSS 23.00统计学软件进行数据分析，计量资料以“x±s”表示，采用t检验，计数资料以[n（%）]表示，采用χ²检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2  结果

2.1    不同采血部位血生化指标结果比较    输液手臂采血者钠、GLU、AST水平均高于非输液手臂采血者，UA、ALT、IgM、TG水平均低于非输液手臂采血者，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1    不同采血部位血生化指标结果比较（x±s）

Table 1  Comparison of Blood Biochemical Index Results from Different Blood Sampling Sites (x±s)

注：ALT，谷丙转氨酶；UA，血尿酸；GLU，血糖；IgM，免疫球蛋白M；TG，三酰甘油

2.2    不同采血时间血生化指标结果比较    上午空腹采血者GLU、TC水平均高于其他时间采血者，TG水平低于其他时间采血者，差异有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2    不同采血时间血生化指标结果比较（x±s，mmol/L）

Table 2  Comparison of blood biochemical indicators at different blood collection times (x±s, mmol/L)

注： GLU，血糖；TG，三酰甘油；TC，总胆固醇

2.3    两组血生化结果比较    观察组ALP、AST、ALT、LDH、K+、CHOL水平均高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；两组CR、TG、GLU、BUN、UA水平比较差异无统计学意义。见表3。

表3    两组血生化结果比较（x±s）

Table 3  Comparison of blood biochemical results between two groups (x±s)

续表

注：ALT，谷丙转氨酶；ALP，碱性磷酸酶；AST，天冬氨酸转氨酶；LDH，乳酸脱氢酶；K+，钾离子；TC，总胆固醇；SCr，血肌酐；UA，血尿酸；GLU，血糖；BUN，尿素氮TG，三酰甘油

2.4    不同送检时间血生化指标结果比较    标准送检者CK、AST、ALT水平均高于1h后送检者，LDH水平低于1h后送检者，差异有统计学意义（P＜0.05），见表4。

表4    不同送检时间血生化指标结果比较（x±s，U/L）

Table 4  Comparison of Blood Biochemical Index Results at Different Test Times (x±s, U/L)

注：ALT，谷丙转氨酶；AST，天冬氨酸转氨酶；LDH，乳酸脱氢酶；CK，肌酸激酶

3  讨论

采血标本溶血等因素是影响生化检验结果的重要因素，主要包括体内溶血、体外溶血两种类型^[5-6]。体内溶血指受到患者自身基础疾病因素影响，服用易诱发溶血药物引起的溶血^[7-8]；体外溶血则主要指外界因素影响，如采血方式不正规、检验人员操作不规范、标本送检中出现剧烈震荡、水浴箱温度过高、被表面活性剂污染等因素引起的溶血^[9-10]。一旦出现溶血，会对临床生化指标检验结果产生较大影响，使检查结果出现偏差，影响患者的临床诊治疗效^[11]。

本研究结果显示，输液手臂采血者钠、GLU、AST水平均高于非输液手臂采血者，UA、ALT、IgM、TG水平均低于非输液手臂采血者，差异有统计学意义（P＜0.05），说明对采血者进行采血时，为保障检验结果的准确性，在对一只手臂输液时，按照规定至少要从另一只手臂取血，以准确反映患者病情。本研究结果显示，上午空腹采血者GLU、TC水平均高于其他时间采血者，TG水平均低于其他时间采血者，差异有统计学意义（P＜0.05），提示采血时尽可能在清晨空腹状态下进行。本研究结果显示，观察组ALP、AST、ALT、LDH、K+、CHOL水平均高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；两组CR、TG、GLU、BUN、UA水平比较差异无统计学意义，提示样本溶血会对ALP、AST、ALT、LDH、K+及CHOL等生化检验指标的影响较大，对CR、TG、GLU、BUN及UA等指标的影响较小，说明采集标本出现溶血后会对患者机体的部分生化指标产生较大影响。本研究结果显示，标准送检者CK、AST、ALT水平均高于1h后送检者，LDH水平低于1h后送检者，差异有统计学意义（P＜0.05），提示采集血液后立即送检和放置1h后送检影响CK、AST、LDH及ALT，说明采血后要及时送检，以保证检测结果的准确度。

为降低样本溶血等发生率，提高检验结果准确度，要求临床生化检验工作要严格控制各个环节，确保遵照相关规范操作，准确使用仪器设备，了解采集标本溶血等因素对生化指标检测结果产生的影响，并做好以下几点预防措施：①加强医护人员培训力度：定期培训检验科医技人员，确保采血规范操作，提高责任意识。要求医技人员采血时严格在无菌环境下操作，熟练掌握采血手法，使用干净整洁的采血器材^[12]。禁止使用乙醇消毒，防止乙醇导致红细胞破裂出现溶血。采集血液时，避免将患者手臂绑的太紧，控制抽血速度，不宜过快，防止红细胞破裂，同时，注意避免其他物质进入血液标本内。另外，采血时注意沿试管壁将血液样本注入试管内，防止产生泡沫。②控制水浴箱温度：将水浴箱温度控制为4～8℃，不宜过高也不宜过低，过高易引起溶血。血液采集完毕进行离心处理时，注意控制好离心速度，防止离心速度快引起溶血^[13]。③采集标本后立即密封：密封可防止标本被污染。④选择最佳采血时间：由本次研究结果可知，采血时间会对部分生化指标产生影响，因此，尽可能在清晨空腹状态下采血，以保证检验结果的准确性。⑤设置抗凝剂和血液的比例：严格根据设置好的比例进行血液采集，防止血液采集过多或过少引起溶血^[14-15]。⑥及早送检：血液标本采集完毕后及早送检，禁止长时间放置^[16]。送检过程中轻拿轻放，不可剧烈晃动，避免溶血。如发生溶血需及时通知体检者再次采集。⑦标本溶血处理方法：如血液样本出现溶血，可见光谱中某些波长的吸收会增加。因此，在检测时可采取双波长对比检测法，提高检测结果准确度。⑧选购正规医疗器械：从正规企业中采购一次性真空抽血器，防止器械质量不过关对临床生化检验指标结果产生影响^[17-20]。

综上所述，样本溶血等相关因素会影响部分临床生化检验项目，为提高临床生化检验数据准确度，要重视标本溶血等现象，及早采取预防措施。

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