【摘要】目的：为了探讨护肾痛风泰颗粒剂对模型大鼠痛风肾的抗炎效应机理。方法：70只大鼠随机分为4组，采用大鼠腺嘌呤所致高尿酸血症肾损害模型。护肾痛风泰颗粒剂组、别嘌呤醇组和模型对照组大鼠先以腺嘌呤灌胃，剂量为300mg/kg/日，造模后第22天开始给药，护肾痛风泰颗粒剂组灌胃中药护肾痛风泰颗粒剂，5g/kg体重。别嘌呤醇组灌胃别嘌呤醇，20mg/kg体重。模型对照组和空白对照组灌胃生理盐水，2ml/kg体重。各组大鼠均灌胃28天。结果：模型大鼠血尿酸、尿素、肌酐水平和血清IL一1含量有显著盖异(P<0．01)。护肾痛风泰组能显著降低模型大鼠血尿酸、尿素氮、肌酐水平和血清IL一1含量，与模型组比较有显著性差异（P <0．01），与别嘌醇组比较无明显差异。结论：护肾痛风泰能明显降低该模型大鼠血尿酸、尿素、肌酐水平和血清IL一1含量。
【关键词】护肾痛风泰 痛风肾模型 血尿酸 尿素氮、肌酐水平、血清IL一1
痛风性肾病（gouty nephropathy, GN），即痛风肾的发病率21世纪以来呈直线上升，它已成为国内的常见病、多发病，而且是疑难病，目前尚缺乏特异而副作用小的药物。2005年7月至2005年12月我们进行了护肾痛风泰颗粒剂对大鼠痛风肾病理模型抗炎机理的实验研究，现将结果报告如下：
1、材料与方法
1.1实验材料
1.1.1实验动物
SD大鼠，雄性，体重（200±20）g，70只，购于广州中医药大学实验动物中心，合格证编号：广东省科委实验动物监测所合格证（粤检证字）第2001A001。随机分成4组：第一组:护肾痛风泰颗粒剂组（20只），第二组:别嘌呤醇组（20只），第三组:模型对照组（20只），第四组:空白对照组（10只）。
1.1.2试剂和检测指标
腺嘌呤（Adenine），进口分装，购于上海伯奥生物科技有限公司产品，批号：20020301。使用前用生理盐水配成50mg/ml的液体。
护肾痛风泰颗粒剂，每袋20g，由深圳市中医院提供，批号：20050312。使用前用生理盐水配成2g/ml的混悬液。
别嘌呤醇片（Allopurinoi tablets），广州市桥制药厂，批号：20041023。使用前用生理盐水配成2mg/ml的液体。
血尿酸、尿素氮和肌酐水平测定采用全自动生化分析仪，由广东省中医院检验科检测。
血清IL一1测定方法采用酶联免疫法，由广州中医药大学分析测试中心检测。
肾脏病理观察采用石蜡切片，HE染色，光镜观察拍照，由广东省中医院病理科制片。
1.2实验方法
1.2.1造模
采用大鼠腺嘌呤所致高尿酸血症肾损害模型。护肾痛风泰颗粒剂组、别嘌呤醇组和模型对照组大鼠以腺嘌呤灌胃，剂量为300mg/kg/日，连续灌胃21天。空白对照组大鼠灌胃生理盐水，2 ml/kg体重。
1.2.2给药
造模后第22天开始给药，护肾痛风泰颗粒剂组灌胃中药护肾痛风泰颗粒剂，5g/kg体重。别嘌呤醇组灌胃别嘌呤醇，20mg/kg体重。模型对照组和空白对照组灌胃生理盐水，2ml/kg体重。各组大鼠均灌胃28天。
1.2.3血清IL一1测定 采用酶联免疫法。试剂盒购于IMMUTECH公司，按说明书操作。用对抗体夹心ELISA法测定IL一1。大鼠取血后即置抗凝管中，离心取其上清作为检测标本。将标准品稀释液100ul加到空白孔和零孔，再将标本和已稀释的不同浓度的标准品分100u1至相应孔中，用封板胶纸封住各孔，37℃静置60min；洗板后，除零孔外，每孔加入浓度为1：600的生物二抗各100ul, 封住板孔．37℃静置60min；洗板后，除零孔外，每孔加入浓度为1：700的酶联物100ul封住板孔。37℃静置20min； 洗板后，每孔加底物A、B各50ul，避光37℃ 15min；每孔加终止液50ul,混匀。即刻在酶标仪450nm处读数。
1.3统计学处理 用方差分析进行统计学分析。
2、结果
2．1各组大鼠肾脏病理改变：
灌胃至28天，护肾痛风泰颗粒剂组有9只大鼠死亡，别嘌呤醇组各有8只大鼠死亡，模型对照组有11只大鼠死亡。空白对照组大鼠肾脏肉眼观察：肾脏包膜呈浅褐色，切面皮髓质交界清楚，末见明显异常。光镜观察：见肾包膜为单层细长上皮细胞被覆，其下有肾小球，10倍物镜下肾小球数量为15-20个，肾小囊腔内末见异常物质，肾曲管、集合管亦未见异常病变。模型对照组肾脏组织学表现为肾髓质和皮质内出现尿酸盐结晶，以髓质内出现尿酸盐结晶尤为明显，肾小管萎缩，肾小球减少。10倍物镜下肾小球数量为5-10个，大小不一，肾小管有浊肿，内有红染物质，肾小管间质部位，可见较多尿酸盐结晶呈针状、双折光放射形排列，间质有出血及灶性淋巴单核细胞反应，个别区域有灶性纤维化。护肾痛风泰组和别嘌呤醇组肾髓质和皮质内尿酸盐结晶比模型对照组明显减少，肾小管萎缩和肾小球减少程度均较模型对照组为轻。
2．2各组大鼠血清IL-1和血尿酸、尿素、肌酐的比较（表1）
表1：护肾痛风泰对模型大鼠血清IL一1和血尿酸、尿素、肌酐的影响（X±S）
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组别 n IL-1（cpm） 血尿酸(μmol/L) 尿素(μmol/L) 肌酐(μmol/L) |
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痛风泰 11 5.38±0.69Δ 72.27±21.41Δ 22.46±5.62Δ 86.11±27.60Δ
别嘌醇 12 5.74±0.71Δ 86.67±21.70Δ 26.32±6.01Δ 105.13±31.90Δ
模型组 9 9.82±0.85* 109.89±25.49* 55.09±7.73* 232.98±32.17*
正常组 10 3.94±0.50 65.30±17.76 7.48±1.22 39.60土7.29 |
注： *与空白对照组比较P<0.01；Δ与模型对照组比较P<0.01
各组大鼠血清IL-1比较，模型对照组血清IL-1水平明显高于空白对照组（P<0.01）。护肾痛风泰组血清IL-1水平较模型对照组明显降低（P<0.05），说明护肾痛风泰能明显降低该模型大鼠血清IL-1水平。护肾痛风泰降低该模型大鼠血清IL-1作用与别嘌呤醇相当（P>0.05）。
各组大鼠血尿酸、尿素和肌酐比较，模型对照组大鼠血尿酸、尿素和肌酐水平较空白对照组明显升高(P<0．01)。护肾痛风泰组和别嘌醇组对模型大鼠升高的血尿酸、尿素和肌酐水平均有显著降低作用(P<0.01)，两组比较差异无显著意义（P>0.05）。
3、讨论
痛风发病率逐年上升，GN发病率也随之呈上升趋势，而且中老年男性发病率较高，它已成为国内的一种较为常见的疾病，是该病致死的首要原因。国内学者着眼于从中医药寻求疗效好、副作用少的药物，取得了一定的进展。我们对GN的发病、病机提出以“湿热浊邪，内蕴肾络；本虚标实，虚实夹杂”立论，采用清热利湿，益肾透邪，解毒化浊之法，研制成护肾痛风泰颗粒剂应用于临床获得较好的疗效。
现代中药药理研究表明，土茯苓、葛根、萆薢能降低血尿酸；威灵仙、秦艽能溶解尿酸并解除尿酸所致疼痛；生苡仁、地龙能排泄尿酸；地龙尚能抑制尿酸合成；熟地、山萸肉、芡实、金樱子能降低尿蛋白，保护肾功能。故诸药合用能使正气充盛，湿热浊邪排出，IL-1和血尿酸、尿素、肌酐水平降低，炎症反应得以抑制，肾脏功能得到改善，从而对防治GN的发生、发展有积极意义。
参考文献
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