白术黄芪汤及有效成分对溃汤性结肠炎的疗效

[摘要]  目的  研讨白术黄芪汤及其有效成分对溃疡性结肠炎的疗效。方法  采用三硝基苯磺酸(TNBS)灌肠法对小鼠进行造模，对其疗效进行综合评价，观测指标为：髓过氧化物酶(MPO)活性。结果  白术黄芪汤及其有效成分对造模小鼠的MPO活性均有一定疗效；有效成分组方疗效略优，与模型组比较差异均有显著性意义(P<0.01)。结论  白术黄芪汤及其有效成分对小鼠溃疡性结肠炎均有一定疗效。
　　[关键词]  溃疡性结肠炎；白术黄芪汤；有效成分

　　[Abstract]  Objective  Discussion of Astragalus Atractylodes Decoction and its effective parts of ulcerative colitis. Methods Trinitrobenzene sulfonic acid (TNBS) enema on mice modeling, a comprehensive evaluation of its efficacy, observations are as follows: myeloperoxidase (MPO) activity. Results Astragalus Atractylodes Decoction and its effective parts of the MPO activity in mice modeling have a certain effect; Active Fraction slightly better efficacy, compared with model group, the differences were significant (P<0.01). Conclusion  Astragalus Atractylodes Decoction and its active fractions on mice with ulcerative colitis have a certain effect.
　　[Key words]  Ulcerative colitis; Astragalus Atractylodes; Effective Ingredient
　　
　　溃疡性结肠炎属中医泻痢等范畴，病程迁延时间较长[2]。本实验使用三硝基苯磺酸致小鼠溃疡性结肠炎模型，观察白术黄芪汤单药提取成分组方对溃疡性结肠炎小鼠的疗效，现将结果汇报如下。
　　1  材料
　　1.1  动物  NIH雄性小鼠，SPF级，购自上海BK公司，月龄4～5周，体重大约25～30g。各组小鼠进行单笼饲养。
　　1.2  试剂及药物  菊科植物白术(Atractylodes， rocephala Koidz．)的根茎、豆科植物蒙古黄芪(Astragalus mongholicus Bge．)的根。白术黄芪汤按原方比例白术（体积比）：药材与蒸馏水比例为1：8，黄芪：甘草=10：7：3，按此比例浸泡4h，煮沸后，用纱布过滤药液；第2次和第3次分别按照1：6和1：4的比例煮沸，纱布过滤，合并3次滤液。本实验按此比例将中药各成分加蒸馏水混匀研磨配成所需浓度。所用原材料中三硝基苯磺酸(TNBS)，十六烷基三甲基溴化胺和邻联二茴香胺由Sigma公司提供。戊巴比妥钠和无水乙醇为国产分析纯。
　　1.3  仪器  紫外可见光分光光度计、D型水浴锅、电子分析天平、电热恒温真空干燥箱。

　　2  方法
　　2.1  动物造模、分组及给药  40只雄性小鼠，禁食24h后，使用1％戊巴比妥钠（45mg／kg）进行腹腔注射麻醉。随机分为4组，为正常对照组、模型对照组、白术黄芪汤组、有效成分组。动物肛门注入TNBS药液（剂量为100mg／kg），倒立30秒使药液达全结肠，将动物放回原笼待其自然苏醒。其中，正常对照组首先注入等量的50％乙醇，造模24h后开始灌胃给药。正常对照组和模型对照组灌蒸馏水；白术黄芪汤组灌水煎剂（10g／kg），有效成分组灌提取物（0.4g／kg），每天一次，连续7天。
　　2.2  MPO活性检测:各组小鼠分别取100mg结肠组织并切碎，置入2mL十六烷基三甲基溴化胺(HTAB)缓冲液中，冰浴中匀浆3次，每次30 S，超声振荡10S，冻溶3次，4000 r／min离心15min，取上清液0.1mL，加入50mmol／L的PBS2.9mL中于460 nm处测吸光率A值，于3min后再次测定吸光率A值。该样品的MPO单位即两次A值差值除以3。

　　3  结果
　　各组MPO活性比较。模型组小鼠MPO活性较正常组明显升高，白术黄芪汤组和有效成分组与模型组比较MPO活性明显降低(P<0.01)，有效成分组效果略优。

组别 MOP活性（U／mg）
正常组 0.51±0.03
模型组   1.97±0.04**
白术黄芪组   0.64±0.07##
有效成分组   0.58±0.04##

注：**:与正常组相比，模型组MOP活性明显升高，P<0．01，有统计学意义。
##:与模型组相比，MOP活性明显降低，P<0．01，有统计学意义。

　　4  讨论
　　溃疡性结肠炎以急性发作的患者为多见，病初邪实，湿热蕴结肠腑；病程较长，反复发作，形成虚实夹杂证，虚为脾虚血亏，实为湿热留恋，肠络瘀阻[3]。《景岳全书·泄泻》曰：“泄泻之本，无不由于脾胃……脾胃受伤，则水反为湿，谷反为滞，而泻痢作矣”。在中医学上，脾虚湿胜在发病及病变过程中有着至关重要的地位，因此，在溃疡性结肠炎特别是恢复期的治疗中，益气健脾利湿等治法自然是重中之重的治疗方法[4]。在泻痢治疗中，下列疗法充分体现了“泄泻之本，无不由脾胃”的中医理论：治疗湿热毒邪郁蒸肠道而致的下痢，泻痢去除后服白术黄芪汤健脾利湿，益气补中[5]。
本实验中，TNBS所致的小鼠溃疡性结肠炎模型组小鼠MPO活性较正常组明显升高。与模型组相比，白术黄芪汤组和有效成分组MPO活性明显降低(P<0.01)，而有效成分组效果略优。从药材提取有效组分是中药现代研究的常用方法，但其中需要探讨的问题仍然很多，这是需要我们以后进一步学习的方向。

　　参考文献
　　[1]  李茹柳,迟莉,石忠峰.白术黄芪汤及其单药提取成分组方对溃疡性结肠炎的治疗作用[J].2007,21(3):223-228.
　　[2]  孙洪凤，李云峰.中药氧灌肠治疗溃疡性结肠炎[J].当代医学，2010，16（25）：146-147.
　　[3]  陈江.溃疡性结肠炎中医病机演变特点探析[J].辽宁中医学院学报,2005,7(3):197.
　　[4]  石忠峰,陈慰文,李茹柳,等.白术黄芪汤及其有效成分组方对小鼠溃疡性结肠炎的疗效观察[J].中药新药与临床药理，2007,18(2): 87-89.
　　[5]  Shi ZF, Chen WW, Li WM, Gao Y. Purification on total astragalosides by macroporous adsorptive resin[J]. Chin Tradit Herb Drugs (中草药), 2005, 36(9): 1322-1325.