内蒙古大兴安岭地区人群接种甲型H1N1流感疫苗21～93天的免疫效果分析

[摘要]  目的  了解内蒙古大兴安岭地区人群接种甲型H1N1流感疫苗免疫效果情况，为进一步开展甲型H1N1流感疫苗接种提供依据。方法  选用随机采样的方法，对内蒙古大兴安岭地区17～68岁693名接种甲型H1N1流感疫苗的特异性抗体进行调查分析，并收集血液标本，应用人H1N1抗体(IgG)酶联免疫分析试剂盒，酶联免疫吸附试验(ELISA)法半定量测定人血清中H1N1IgG含量。结果  内蒙古大兴安岭地区接种甲型H1N1流感疫苗的693人中特异性抗体阳转率为88.74%。接种该疫苗后所产生的特异性抗体，在年龄、性别上差异没有统计学意义(P>0.05)，与接种甲型H1N1流感疫苗到采样的间隔时间有关，21～70天与71～93天之间比较，差异有统计学意义(P<0.01)。结论  内蒙古大兴安岭地区甲型H1N1流感疫苗接种工作取得了良好免疫效果，但随着时间的推移，接种疫苗70天后人体对甲型H1N1流感免疫水平有显著下降的趋势。
　　[关键词]  甲型H1N1流感；疫苗；抗体；阳转率

　　[Abstract]  Objective Understood that Inner Mongolia Daxinganling Area in the crowd vaccinates the influenza A/H1N1 vaccine immunity effect situation, to further carry out the influenza A/H1N1 vaccine vaccination to provide the basis. Methods Selects the stochastic sampling the method, carries on the diagnosis to the Inner Mongolia Daxinganling Area 17～68 year old of 693 vaccination influenza A/H1N1 vaccine's specificity antibody, and collection blood preparation, the enzyme unites the immunity analytical reagent box using the person H1N1 antibody(IgG), uses the Enzyme-Linked Immunosorbent Assays (ELISA) in the law semi-quantitative determination person blood serum the H1N1IgG content. Results The Inner Mongolia Daxinganling Area vaccination influenza A/H1N1 vaccine's 693 person of specificity antiboty positive rate is 88.74%. After vaccinating this vaccine, produces specificity antiboty,  in the age, the sex the difference does not have statistics significance(P>0.05),with vaccination influenza A/H1N1 vaccine to sampling time interval related, 21～70 days compare with 71～93 days, the difference has statistics significance(P<0.01).Conclusion Inner Mongolia Daxinganling Area influenza A/H1N1 vaccine vaccination work has made the good immunity progress,but with the lapse of time, vaccination vaccine 70 days later the human body has the remarkable drop tendency to the influenza A/H1N1 immunity level.
　　[Key words]  Influenza A/H1N1; Vaccine; Antiboty; Positive rate
　　新型甲型H1N1流感最早发现于2009年3月在墨西哥暴发的“人感染猪流感”疫情，之后迅速在全球范围内蔓延。6月11日WHO将流感流行警告级别提高到6级，全球进入流感大流行阶段[1]。接种甲型H1N1流感疫苗是预防和控制甲型流感目前最经济、最有效的措施。为了解内蒙古大兴安岭地区人群疫苗免疫效果、抗体维持时间，进行随机调查分析。
　　1  对象与方法
　　1.1  对象  在该地区接种甲型H1N1流感疫苗的17～68岁人群中，随机抽样693名进行统计分析。接种的甲型H1N1流感疫苗是中国华兰生物疫苗有限公司制成的甲型H1N1流感病毒裂解疫苗(接种15μg/0.5ml，1剂次，于上臂外侧三角肌肌内注射)。疫苗批号：200908A034。调查对象无药物过敏史，在3个月内均无使用药物及感冒病史者。
　　1.2  方法  采用武汉华美生物制品有限公司生产的人H1N1抗体(IgG)酶联免疫分析试剂盒(产品编号CSB-E12865h)，酶联免疫吸附试验(ELISA)法半定量测定人血清中H1N1IgG含量。空腹全血标本于室温放置2小时后予1000xg离心20分钟，取上清液进行检验。样品用样品稀释液1：401稀释，用移液枪混匀。临用前以辣根过氧化物酶标记抗人IgG稀释液稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl)，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。为了确保实验结果的准确性，在实验过程中将标本、酶联二抗、TMB(3，3′，5，5′-四甲基联苯胺)以及终止液等每一步的加样时间控制在3分钟内。采取目测法和读数法综合判断，目测法：与阴性孔相比，有明显变色的为阳性，未有明显变色的为阴性。读数法：用酶标仪在450nm波长依次测量各孔的光密度(OD值)，判断值=1.4×阴性孔平均OD值，大于等于判断值为阳性，小于判断值为阴性。
　　1.3  统计学处理  采用SPSS.V13.0软件包进行方差分析、t检验以及相关分析。以P<0.05为差异具有统计学意义。
　　2  结果
采样693名中检测抗体阳性有546(占78.79%)人，弱阳性69(占9.96%)人，阴性78(占11.25%)人。从接种甲型H1N1流感疫苗到采集样本检测甲型H1N1流感特异性抗体间隔时间为21～93天，平均间隔时间67.79天。平均年龄35.45岁。

表1  研究对象的间隔天数分布及检测结果比较

我们将接种对象分为4组：17岁～29岁(239例，阳转率88.70%)、30岁～39岁(180例，阳转率92.22%)、40～49岁(215例，阳转率86.05%)和50岁～68岁(59例，阳转率88.14%)，各组阳转率比较，无统计学意义(P>0.05)。
男性196例(占28.28%)，阳转率90.31%；女性497例(占71.72%)，阳转率88.13%；两者阳转率比较，无统计学意义(P>0.05)。
接种甲型H1N1流感疫苗到采样的间隔时间(21～70天与71～93天)之间比较，有统计学意义(P<0.01)。70天后甲型H1N1流感特异性抗体(IgG)的阳转率呈显著下降趋势。见表1、表2。
　　3  讨论
本次研究发现接种甲型H1N1流感病毒裂解疫苗后所产生的特异性抗体与年龄、性别均没有可比性。还发现接种甲型H1N1流感疫苗后21～70天人体免疫水平处于较高的水平，阳转率在94.66%，71～93天阳转率为82.49%，较70天前有明显下降。接种甲型H1N1流感病毒裂解疫苗后的第21～70天阳转率在90%以上，70天后人体对甲型H1N1流感的免疫水平开始有显著下降趋势，并且比较明显，应该引起我们的重视。这与普通流感接种疫苗后，随着免疫时间的延长，体内抗体会逐渐下降相同。
甲型H1N1流感具有传染性较强[2]，传播速度快、传播范围广等特点[3]。据国外资料报道[4-5]，有无慢性基础性疾病，患甲型H1N1流感后都有可能迅速发展为重症病例，甚至发展为危重病例。目前全人群的整体免疫保护水平仍较低，有效的免疫保护屏障尚未建立[6]。故甲型H1N1流感的防控工作相当严峻。
　　疫苗接种是预防大流行的理想方案，并要兼顾疫苗的有效性和安全性[7]。我国研制的甲型H1N1流感疫苗是采用世界卫生组织推荐的甲型H1N1流感病毒株经过鸡胚培养、灭活病毒、纯化、裂解等工艺后制成的甲型H1N1流感病毒裂解疫苗。国家通报副作用和不良反应的发生率很低，从接种效果来看也取得了理想的效果，可以继续推广使用。
　　接种疫苗将极大增强易感人群的整体免疫力，从整体上保护易感人群。已接种人群中将不会出现大规模甲型H1N1流感暴发，但接种疫苗防控甲型H1N1流感不是唯一手段。疫苗对高危人群有保护作用，却不能阻止流感病毒的流行[8]。目前，仍然应该继续落实综合防控措施。
内蒙古大兴安岭地区甲型H1N1流感疫苗接种工作取得了良好免疫效果,但随着时间的推移，接种疫苗70天后人体对甲型H1N1流感的免疫水平有显著下降的趋势。裂解疫苗中含有数量极少的物质可以刺激免疫系统产生抗体和专门作用于特定的病毒或细菌的细胞，此疫苗不能生长繁殖，做为抗原第一次进入机体，经一定的潜伏期才能产生抗体，由于对机体刺激时间短，抗体在体内维持的时间也较短。在目前没有出现大范围病毒变异的情况下，是否给予高危人群进行加强免疫，也是摆在我们面前的一个问题，值得同道商榷。
　　
　　参考文献
　　[1] World Health Organization.On 11 June 2009,the pandemic(H1N1) 2009 was declared[EB/OL].(2009-06-26).http://www.euro.who.int/influenza/20080618 2.
　　[2] Carmo EH,de Oliveira WK.The risk of a pandemic with the influenza A (H1N1) virus[J].Cad Saude Publica,2009,25:1192-1193.
　　[3] 王勇,徐元勇,张传福，等.甲型H1N1流感的研究进展[J].解放军医学杂志,2009,34(6):651-653.
　　[4] Jain S,Kamimoto L,Bramley AM,et al.Hospitalized patients with 2009 H1N1 influenza in the United States,April-June 2009[J/OL].N Engl J Med,2009,361:E1[2009-10-30].http://content.nejm.org/cgi/content/full/NEJMoa0906695vl.[published online ahead of print July Oct 8,2009.
　　[5] Kumar A,Zarychanski R,Pinto R,et al.Critically ill patients with 2009 influenza A(H1N1) infection in Canade[J].JAMA,2009,302:1872-1879.
　　[6] 中华人民共和国卫生部.世卫组织呼吁继续重视甲流疫苗接种[EB/OL].(2009-12-25).http://www.moh.gov.cn/publicfiles/business/htmlfiles/H1N1/s10621/200912/45256.htm
　　[7] Enserink M,Kaiser J.Swine flu outbreak.Devilish dilemmas surround pandemic flu vaccine[J].Science,2009,324:702-705.
　　[8] 王艳,王丹丹,孙铁英.新型甲型H1N1流感研讨会纪要[J].中华结核和呼吸杂志.2009,32:644-645.