化学发光法定量测定血液HCG的间接质量保证

【摘要】  目的 建立定量测定血液人绒毛膜促性腺激素（HCG）的间接质量保证。方法 采用胶体金法对472例血液标本进行定性测量，然后根据定性测量结果的强弱将待测血液标本按一定比例预稀释后使用化学发光法（CLIA）[1]进行定量测试。结果 经预处理后的标本，其检测相对光强度有98.4%落在A点和F点之间。 结论 血液HCG的定性测定可间接反映定量测定的结果。

【关键词】人绒毛膜促性腺激素；定性 ；化学发光；定量；间接质量保证

在使用LUMINO化学发光仪直接定量测定血液人绒毛膜促性腺激素（HCG）时,我们经常会发现有很多检测标本的相对光强度高于曲线中F点的相对光强度,虽然仪器仍可以计算出标本的浓度,但是这一浓度不一定非常准确[2]。为了得到更准确的标本值，我们不得不将标本按一定的倍数稀释后重新测试，直至检测标本的相对光强度落在A和F点之间。为了解决重新测试这一耗时耗力耗试剂的被动工作模式，我们对操作程序作了一些改进，发现效果很好。此方法即采用胶体金法对血液标本进行定性测量，根据定性结果的强弱按一定比例将血液标本预稀释，然后按LUMINO化学发光试剂盒说明书中所列操作程序进行定量测试。稀释后检测标本的相对光强度绝大部分落在了A点和F点之间。HCG定性测量结果的强弱可间接的反映定量测量结果，从而使血液HCG的定量测定有更直观的间接质量保证。

1 材料和方法
1．1 仪器
 采用深圳新产业公司代理的德国LUMINO化学发光仪。
1．2 试剂 
1.2.1  发光仪配套试剂。
1.2.2  尿液HCG定性试纸（蓝十字生物药业公司生产）。
1．3 标本来源
2007年1月~8月在我院就诊需定量检测血液人绒毛膜促性腺激素（HCG）的患者472例。
1．4 方法
1.4.1 严格按照LUMINO化学发光仪及试剂盒使用说明书进行操作,曲线采用6个标准值即A、B、C、D、E、F标准品定标绘制。
1.4.2 取6支尿液HCG试纸条按其操作规程分别测试A、B、C、D、E、F标准品，观察各标准品阳性反应线的颜色色度。将各试纸条反应后的结果用数码相机拍摄，制成标准反应色带图片后保存于电脑中，以便随时比较。
1.4.3 调出电脑中的标准反应色带图片。将待测血液标本离心分离血清，用尿液HCG试纸定性测量血液标本，然后将定性测量结果与标准反应色带图片中的反应结果比较，若定性结果在A点和F点之间，则无需预稀释；若结果与F点相近可稀释10倍；若结果略大于F点可稀释20倍；若结果明显大于F点可稀释100倍。

2 结果
    经统计，472例标本中有176例定性测量结果在A和F点之间（无需预稀释），85例定性结果与F点相近(预稀释10倍)，62例略大于F点（预稀释20倍），49例结果明显大于F点（预稀释100倍）。经预稀释处理后的标本按测定程序测定，除了有6例稀释标本的相对光强度大于F点的相对光强度之外，其余均处于A点和F点之间，初次测定的成功率为98.4%。通过对血液标本的定性测量，可以间接的判断待测标本测定值所在范围，待实际检测结果出来后又可佐证对定性测量结果的判断，从而保证了检测质量。

3 讨论
定量测定血液HCG在临床上应用范围较广，对疾病的诊断及疗效观察有很强的针对性，如早期妊娠、葡萄胎、绒毛膜癌等疾病的鉴别诊断，先兆流产保胎治疗后的疗效观察，异位妊娠，绒毛膜癌、葡萄胎等恶性肿瘤的保守治疗或术后的疗效[1]观测等均需要适时检测HCG含量，因此，保证HCG定量测定的准确性至关重要。采用尿液HCG定性测量的方法对血液标本定性测量，对等于或大于曲线F点标准值的标本进行预稀释后定量测定，此方法不仅节约了因反复复查所消耗的大量试剂及时间，也为待测标本的预期检测结果有一直观的判断，从而得到更准确的标本值。

参考文献
[1]叶应妩等.人绒毛膜促性腺激素(HCG)测定.全国临床检验操作规程.第3版.南京:东南大学出版社,2006:708-709.
[2]LUMINO化学发光仪.HCG测定试剂盒使用说明书.2006.6.28